Promoottorijärjestelmiä rekombinanttiproteiinituotantoon E. colissa

No Thumbnail Available

Files

URL

Journal Title

Journal ISSN

Volume Title

Kemiantekniikan korkeakoulu | Bachelor's thesis
Electronic archive copy is available locally at the Harald Herlin Learning Centre. The staff of Aalto University has access to the electronic bachelor's theses by logging into Aaltodoc with their personal Aalto user ID. Read more about the availability of the bachelor's theses.

Date

2024-05-20

Department

Major/Subject

Biotuotteet

Mcode

CHEM3048

Degree programme

Kemiantekniikan kandidaattiohjelma

Language

fi

Pages

37

Series

Abstract

E. coli -bakteeri on yksi käytetyimmistä bakteereista rekombinanttipro-teiinien tuotannossa ja sen monipuoliset ominaisuudet tekevät siitä erinomaisen isäntäorganismin monenlaisten rekombinanttiproteiinien tuotantoon. Rekombinanttiproteiinit ovat geenitekniikan tuloksena soluissa tuotettuja proteiineja, joilla on laaja käyttöalue nykyään esimerkiksi elintarviketeollisuudessa entsyymien kautta ja lääketeollisuudessa rokotteiden ja hormonien kautta. Yksi oleellisimmista rekombinanttiproteiinien tuotantoon liittyvistä tekijöistä on promoottorin valinta, jolla on suora vaikutus tuotetun rekombinanttiproteiinin määrään. Tässä työssä tarkastellaan promoottorin valinnan lisäksi kolmea korkean ekspressiotason promoottoria ja niiden optimointia E. coliin pohjautuvassa tuotannossa, sekä tehdään katsaus promoottoriteknologian mahdollistamiin sovelluksiin ja tulevaisuuden näkymiin. Heterologisten proteiinien ilmentäminen tuottaa usein ongelmia ekspressiosysteemeissä, jonka vuoksi ekspression säätäminen on lähes aina pakollista. Onnistuneella optimoinnilla on mahdollista tuottaa suurempia määriä haluttua proteiinia sekä samalla vähentää syntyvien kustannuksien määrää. Optimoinnin kohteena on useasti esimerkiksi isäntäorganismin kannan valinta, ekspression vuotavuus, indusoinnin säätely, fermentointitavan valinta sekä ekspressiovektorin stabiilisuus. Täydellistä korkean ekspressiotason promoottoria, joka osoittaisi minimaalista rasitusta isäntäorganismia kohtaan, ei olla vielä löydetty. Promoottoriteknologian kehityksen ansiosta uusien varianttien löytäminen ja vaihtoehtoisten tuotantotapojen laatiminen on kuitenkin tuonut yhä parempia ja tehokkaampia järjestelmiä saataville.

Description

Supervisor

Kontturi, Eero

Thesis advisor

Sammalisto, Fred-Eric

Keywords

E. coli, promoottori, rekombinanttiproteiini, geeniekspressio

Other note

Citation