Rasvahappojen mikrobiologinen esteröintiprosessi

No Thumbnail Available

URL

Journal Title

Journal ISSN

Volume Title

Helsinki University of Technology | Diplomityö
Checking the digitized thesis and permission for publishing
Instructions for the author

Authors

Date

2007

Department

Kemian tekniikan osasto

Major/Subject

Biokemia ja mikrobiologia

Mcode

Kem-30

Degree programme

Language

fi

Pages

104

Series

Abstract

Runsaasti rasvaa keräävät mikrobit pystyvät akkumuloimaan sisäänsä rasvaa jopa 40-70 % solun kuiva-aineesta. Työn kirjallisuuskatsauksessa tarkasteltiin rasvaa keräävistä mikrobeista hiivoja, niiden rasvan akkumuloimiseen liittyvää metaboliaa, rasvan keräyksenkannalta oleellisia kasvuolosuhteita sekä rasvan keräykseen liittyvää selektiivisyyttä. Työn kokeellisessa osassa tarkasteltiin kasvatusalustan rasvahappojen keräämistä kasvaviin ja stationäärikasvuvaiheen saavuttaneisiin hiivasoluihin. Lisäksi tarkasteltiin kasvatusalustan hiilen- ja typenlähteiden määrien välisen suhteen (C:N-suhde) vaikutusta sekä hiivasolujen kykyyn kerätä kasvatusalustan rasvahappoja että akkumuloidunrasvan puhtauteen. Stationäärivaiheeseen kasvatettujen hiivasolujen osalta tarkasteltiin myös solujen kykyä esteröidä akkumuloitu rasva hiivan triasyyliglyseroliin (TAG) ja tähän vaikuttavia tekijöitä. Saatuja tuloksia sovellettiin biologisin vaihein tuotetun vapaan konjugoidun linolihapon (CLA) esteröimiseen hiivasolujen avulla kauraseoksesta. Kokeet suoritettiin 250 ml erlenmayer-pulloissa panoskasvatuksina ja rasvahappoanalyysien avulla seurattiin rasvahappopitoisuuksien muutoksia hiivasoluissa tai hiivakauraseoksessa. Kasvatusalustan C:N-suhteella ei havaittu olevan oleellista vaikutusta kolmen tutkitun Yarrowia lipolytica -kannan kykyyn akkumuloida kasvatusalustan linoleenihappoa (C18:3). Ensisijaisesti C:N-suhde vaikutti hiivan omien rasvahappojen tuottoon ja tätä kautta kerätyn rasvahapon puhtauteen. Stationäärikasvuvaiheessa olevat Y.lipolytica -hiivat keräsivät kasvatusalustaan solujen kasvuvaiheen jälkeen lisättyjä rasvahappoja suurempia määriä kuin kasvavat hiivasolut. Tällöin myös akkumuloidun rasvan osuus solun rasvasta oli korkeampi. Solujen esikasvatusaika vaikutti hiivasolujen kykyyn esteröidä rasvahappoja ja myös hiivakantojen kyvyssä akkumuloida ja esteröidä kerätty rasva TAG:iin oli eroja. Parhaimmillaan stationäärivaiheeseen kasvatettu Y. lipolytica -hiiva akkumuloi C18:3:a kasvatusalustasta hiivarasvaan 144 mg/g solun kuivapainoa kohti, jolloin lähes 90 % solun ottamasta C18:3:sta oli esteröity TAG:iin. Vastaavasti CLA:a sisältäneestä kasvatusalustasta hiiva akkumuloi sitä solun rasvoihin 125 mg/g, josta esteröitynä oli 66 %. Kokeellisen osan viimeisessä vaiheessa CLA tuotettiin ensin kauraseokseen biologisesti hydrolysoimalla kauran rasvoja kauran lipaasien avulla vapaan linolihapon tuottamiseksi ja tämän jälkeen isomeroimalla vapaa linolihappo propionibakteerin avulla CLA:ksi. Stationäärikasvuvaiheessa kauraseokseen siirrettyjen Y. lipolytica -hiivasolujen osoitettiin CLA:n tuottoa seuranneessa vaiheessa esteröivän kauraseoksen CLA:a TAG:iin.

Description

Supervisor

Nordström, Katrina

Thesis advisor

Hokkanen, Sanna
Vahvaselkä, Marjatta

Keywords

Other note

Citation

Permanent link to this item

https://urn.fi/URN:NBN:fi:aalto-2020120553862

Collections

[dipl] Teknillinen korkeakoulu / TKK