Tyrosinaasin seulonta mikro-organismeista

Thumbnail Image

URL

Journal Title

Journal ISSN

Volume Title

Helsinki University of Technology | Master's thesis
Checking the digitized thesis and permission for publishing
Instructions for the author
Location:
P1 Ark TKK

Authors

Date

2003

Department

Kemian tekniikan osasto

Major/Subject

Biokemia ja mikrobiologia

Mcode

Kem-30

Degree programme

Language

fi

Pages

vii + 85 s. + liitt.

Series

Abstract

Tämän työn tarkoituksena oli seuloa tyrosinaaseja tuottavia mikrobeja VTT:n kantakokoelmasta. Työssä kehitettiin maljatesteihin perustuva tyrosinaasiaktiivisuuden seulontamenetelmä. Positiivisen maljaindikaation antaneilla mikrobeilla suoritettiin nestemäisiä ravistelukasvatuksia. Työn kirjallisuusosassa käsitellään tyrosinaasientsyymiä, sen rakennetta, katalysoimia reaktioita ja tehtäviä. Tyrosinaasilla on esim. elintarvike-, lääke- ja tekstiiliteollisuudessa monia mielenkiintoisia sovelluksia. Tutkimusosassa kehitettiin maljatesteihin perustuva seulontamenetelmä tyrosinaasipositiivisten mikrobien seulontaan. Tyrosinaasin tuotto havaittiin indikaattorien värireaktiona. Indikaattoreina käytettiin L-tyrosinaasia, p-kresolia, tyramiinia, p-kumariinihappoa, 2-amino-3-hydroksibentsoehappoa ja (+)-katekiinia. Tällä menetelmällä seulottiin VTT:n kantakokoelmasta 14 eri homekantaa ja 18 eri bakteerikantaa. Seulotuista homekannoista 11 ja bakteerikannoista kolme oli tyrosinaasipositiivisia. Uusia tuottajia löydettiin kuusi, viisi hometta ja yksi bakteeri. Positiiviseksi todettuja kantoja kasvatettiin nestemäisillä alustoilla. Tyrosinaasin tuottoa seurattiin aktiivisuusmittauksilla sekä solun sisä- että ulkopuolelta. Tyrosinaasin tuotto seulonnassa löytyneillä uusilla kannoilla osoittautui jatkotutkimusten kannalta vaikeaksi, sillä entsyymien tuottotasot jäivät alhaisiksi.

Description

Supervisor

Laakso, Simo

Thesis advisor

Kruus, Kristiina

Keywords

Other note

Citation

Permanent link to this item

https://urn.fi/URN:NBN:fi:aalto-2020120450015

Collections

[dipl] Teknillinen korkeakoulu / TKK