Tuotantoeläimistä eristettyjen termofiilisten kampylobakteerien mikrobilääkeresistenssi

Loading...
Thumbnail Image

URL

Journal Title

Journal ISSN

Volume Title

Helsinki University of Technology | Master's thesis
Checking the digitized thesis and permission for publishing
Instructions for the author
Location:
P1 Ark TKK

Date

Mcode

Kem-30

Degree programme

Language

fi

Pages

viii + 91 s. + liitt. 10

Series

Abstract

Työn kirjallisuusosassa tarkasteltiin kampylobakteerien esiintymistä ympäristössä ja niiden taudinaiheuttamiskykyä eläimillä ja ihmisillä, kampylobakteereihin vaikuttavien mikrobilääkkeiden käyttöä Suomessa, menetelmiä kampylobakteerien mikrobilääkeherkkyyden tutkimiseksi ja mikrobilääkeaineiden vaikutus- ja resistenssimekanismeja. Kokeellisen osan tarkoituksena oli selvittää suomalaisista sioista ja naudoista eristetyillä Campylobacter coli- ja Campylobacter jejuni -kannoilla esiintyvää mikrobilääkeresistenssiä sekä tutkia resistenttien kantojen gyrA-geenissä esiintyviä mutaatioita. Mikrobilääkeherkkyys määritettiin nestelaimennusmenetelmällä. Mikrotiitterilevyille pipetoitavan suspension bakteeritiheys saatiin vakioitua esikasvattamalla bakteereita Brusella-liemessä. Kontrollikantana mikrobilääkeherkkyysmäärityksissä käytettiin C. jejuni ATCC 33560 -kantaa. Kinoloniresistenssiä aiheuttavia mutaatioita tutkittiin resistenteistä C. coli- ja C. jejuni -kannoista mismatch amplification mutation assay (MAMA) -PCR -menetelmällä. Tutkituista C. coli -kannoista 17 % ja C. jejuni -kannoista 10 % oli resistenttejä ainakin yhdelle tutkituista mikrobilääkeaineista. Merkille pantavaa oli, että molemmilla bakteereilla resistenssi oli yleisintä nalidiksiinihapolle ja enrofloksasiinille. Havaittu mikrobilääkeresistenssi on todennäköisesti seurausta eläimille käytetyistä mikrobilääkeaineista. Resistenssin yleisyys nalidiksiinihapolle ja enrofloksasiinille saattaa johtua myös resistenssimekanismin yksinkertaisuudesta. Kinoloniresistenssin syntymiseen tarvitaan vain yksi pistemutaatio. Sioista eristetyillä C. coli -kannoilla havaittu resistenssi erytromysiinille, jota ei käytetä tuotantoeläinten lääkinnässä, voi olla seurausta muiden makrolidien käytöstä. Oksitetrasykliiniresistenssiä esiintyi tutkituilla kampylobakteerikannoilla vähän. C. coli -kannoilla ei esiintynyt resistenssiä ampisilliinille, mutta C. jejuni -kannoilla ampisilliiniresistenssiä esiintyi vähän. Resistenssiä ei havaittu eläinten lääkinnässä kielletylle gentamysiinille. Kinoloniresistenssiä aiheuttavia mutaatioita osoitettiin C. jejuni -kantojen gyrA-geenin nukleotidissa 257, mutta samojen kantojen nukleotidissa 268 ei havaittu mutaatioita. C. coli -kantojen gyrA-geenin nukleotidissa 257 esiintyvän mutaation osoittamiseksi käytetty menetelmä antoi epäluotettavia tuloksia alukkeiden epäspesifisen kiinnittymisen takia. Mikrobilääkeresistenssi on seurausta mikrobilääkeaineiden käytöstä. Kampylobakteereilla havaittu melko vähäinen resistenssi kertoo siitä, että kampylobakteereihin vaikuttavien mikrobilääkkeiden käyttö sioilla ja naudoilla on ollut suhteellisen vähäistä Suomessa. Tosin eristettyjen kampylobakteerien resistenssi nalidiksiinihapolle ja enrofloksasiinille on huolestuttavaa, sillä eläimistä suoraan tai elintarvikkeiden välityksellä kulkeutuvat resistentit kampylobakteerit voivat aiheuttaa ihmisillä hankalasti hoidettavia infektioita.

Description

Supervisor

Nordström, Katrina

Thesis advisor

Myllyniemi, Anna-Liisa
Gindonis, Veera

Keywords

Other note

Citation