Natiivia ja resistenttiä tärkkelystä pilkkovat amylaasit

Thumbnail Image

URL

Journal Title

Journal ISSN

Volume Title

Helsinki University of Technology | Master's thesis
Checking the digitized thesis and permission for publishing
Instructions for the author
Location:
P1 Ark TKK

Authors

Date

2004

Department

Kemian tekniikan osasto

Major/Subject

Biokemia ja mikrobiologia

Mcode

Kem-30

Degree programme

Language

fi

Pages

68+5

Series

Abstract

Työn kirjallisuusosassa on tarkasteltu tärkkelyksen rakennetta ja resistentin tärkkelyksen käsitettä. Tärkkelystä hydrolysoivat entsyymiryhmät on esitelty lyhyesti. Työn tarkoituksena oli löytää natiivia ja/tai resistenttiä tärkkelystä tehokkaasti pilkkovia bakteeriperäisiä amylaaseja. Tavoitteen saavuttamiseksi kehitettiin menetelmä tällaisia entsyymejä erittävien bakteerien seulomiseksi. Kehitettyä seulontamenetelmää käyttäen eristettiin ja puhdistettiin noin 200 bakteerikantaa, joilla oli amylaasiaktiivisuutta. Eristetyistä kannoista peräisin olevien entsyymien kykyä hydrolysoida natiivia tärkkelystä tutkittiin ja verrattiin haimaperäiseen ja Bacillus subtilis -bakteerista peräisin olevaan a-amylaasiin. Useat eristetyistä entsyymeistä hydrolysoivat natiivia tärkkelystä tehokkaammin kuin vertailuamylaasit. Käytetyllä seulontamenetelmällä ei löydetty entsyymejä, jotka olisivat hydrolysoineet resistenttejä tärkkelysmuotoja vertailuamylaaseja tehokkaammin. Eristettyjen entsyymien kyky hydrolysoida resistenttiä tärkkelystä korreloi vain osittain niiden natiivin tärkkelyksen hydrolysointikyvyn kanssa. Yksi eristetyistä kannoista tunnistettiin 16 S RNA -geenin sekvenssinsä perusteella Bacillus subtilis -bakteeriksi. Kehitetty seulontamenetelmä soveltui hyvin natiivia tärkkelystä hydrolysoivien entsyymien etsimiseen. Resistenttiä tärkkelystä hydrolysoivien entsyymien seulontaan menetelmä ei soveltunut yhtä hyvin. Työn tavoite saavutettiin siis natiivia tärkkelystä pilkkovien entsyymien osalta, mutta tehokkaasti resistenttiä tärkkelystä pilkkovia entsyymejä ei löydetty.

Description

Supervisor

Nordström, Katrina

Thesis advisor

Miasnikov, Andrei

Keywords

Other note

Citation

Permanent link to this item

https://urn.fi/URN:NBN:fi:aalto-2020120450535

Collections

[dipl] Teknillinen korkeakoulu / TKK