Monoklonaalisten vasta-aineiden käyttö Helicobacter pylori antigeenin osoituksessa

No Thumbnail Available

URL

Journal Title

Journal ISSN

Volume Title

Helsinki University of Technology | Diplomityö
Checking the digitized thesis and permission for publishing
Instructions for the author

Authors

Date

2000

Department

Kemian tekniikan osasto

Major/Subject

Biokemia

Mcode

Kem-30

Degree programme

Language

fi

Pages

viii + 68 s. + liitt. 28

Series

Abstract

Työn tarkoituksena oli kehittää menetelmä Helicobacter pylori antigeenin osoittamiseksi ulostenäytteestä QuikRead-analysaattorilla käyttäen monoklonaalisia vasta-aineita (mab). Työn kirjallisuusosassa tarkastellaan H. pylori -bakteeria, sen kasvuympäristöä sekä sen aiheuttamaa tautikirjoa ja helikobakteeri-infektion tunnistusmenetelmiä. Lisäksi kirjallisuusosassa kerrotaan lateksien valmistusmenetelmistä ja päällystystavoista sekä monoklonaalisista vasta-aineista. Lateksin ja monoklonaalisen vasta-aineen ominaisuudet vaikuttavat kitin toimivuuteen. Tutkimusosassa päällystettiin latekseja neljällä eri mab:lla. Näistä parhaimmat vasta-aine-antigeeni-reaktiot antoivat mab:lla III 5E3A3 ja III 5E3A9 päällystetyt lateksit. Näillä latekseilla tutkittiin lateksin määrän ja koon sekä detergenttien vaikutusta reaktioon. Reaktionopeus kasvoi lateksin määrän kasvaessa, mutta partikkelikoon pienentäminen ei puolestaan tuonut parannusta reaktionopeuteen. Detergenteistä Triton X-100:lla oli paras vaikutus reaktionopeuteen. Kun sopiva lateksi- ja puskurikoostumus oli valittu siirryttiin tekemään kokeita ulostenäytteillä. Ulosteliuoksen pitoisuudella oli huomattava vaikutus reaktioon. Liian vahva ulosteliuos näytti inhiboivan mab-antigeeni-reaktiota. Näissä mittauksissa reaktionopeus kasvoi lateksin määrän kasvaessa aivan kuten ilman ulostetta mitattaessa. Työn tutkimusosassa verrattiin myös tämän menetelmän herkkyyttä markkinoilla olevaan testiin. Mab:lla III 5E3A3 päällystetty lateksi vaikutti olevan hieman herkempi kuin mab:lla III 5E3A9 päällystetty lateksi. Lateksien väliset erot olivat kuitenkin pienet. Silti herkkyys ei yltänyt aivan markkinoilla olevan kitin tasolle. Myöskään partikkelikoon muutos ei parantanut herkkyyttä. Tutkimusosassa pystyttiin osoittamaan, että lateksi voitiin päällystää monoklonaalisilla vasta-aineilla ja tällaisen lateksin avulla H. pylori antigeenin osoitus ulostenäytteestä QuikRead-analysaattorilla oli mahdollista.

Description

Supervisor

Nordström, Katrina

Thesis advisor

Häivä, Veli-Mies

Keywords

Other note

Citation

Permanent link to this item

https://urn.fi/URN:NBN:fi:aalto-2020120447148

Collections

[dipl] Teknillinen korkeakoulu / TKK