O-GlcNAcylation of the transcription machinery in prostate cancer cells

Thumbnail Image

URL

Journal Title

Journal ISSN

Volume Title

Kemian tekniikan korkeakoulu | Master's thesis

Authors

Date

2021-08-23

Department

Major/Subject

Biosystems and Biomaterials Engineering

Mcode

CHEM3028

Degree programme

Master’s Programme in Life Science Technologies

Language

en

Pages

8+61

Series

Abstract

O-GlcNAcylation is a post-translational protein modification overexpressed in the most aggressive prostate cancer, which is the most common cancer type amongst men in Finland. O-GlcNAcylation has been found to play a role in gene transcription as an alternative protein modification to phosphorylation by transcription-associated cyclin-dependent kinases (TCDK). The aim of this thesis is to study the O-GlcNAcylation of transcriptional machinery in prostate cancer cells when inhibiting each TCDK activity. Cancer cells were first treated with on-target doses of TCDK inhibitors, followed by enrichment of O-GlcNAcyted proteins using lectin pulldown and investigating transcriptional machinery proteins levels by performing western blot. Results revealed a significant increase of CDK9 O-GlcNAcylation after inhibiting CDK9 activity in all used prostate cell lines. These findings highlight the important and yet not well-known role of O-GlcNAcylation in gene transcription in prostate cancer cells.

Proteiinisynteesin jälkeisen käsittelyreaktion, jossa N-asetyyliglukosamiini kiinnitetään proteiiniin O-glykosidisella sidoksella (O-GlcNAsylaatio, eng. O-GlcNAcylation), on huomattu lisääntyvän aggressiivisimmassa eturauhassyövässä, joka on yleisin syöpätyyppi miehillä Suomessa. Tutkimukset ovat todenneet O-GlcNAsylaation toimivan vaihtoehtoisena transkription säätelijänä transkriptionaalisille kinaasien (TCDK) fosforylaatioille. Tämän opinnäytetyön tarkoitus on tutkia O-GlcNAsylaatiota eturauhassyöpäsolujen transkriptiossa. Tutkimus toteutettiin estämällä TCDK:ien toimintaa soluissa, puhdistamalla O-GlcNAsyloituneet proteiinit proteiiniuutteesta lectin pulldown -menetelmällä ja tutkimalla proteiinitasoja western blot -menetelmällä. Tutkimuksessa huomattiin CDK9-proteiinin O-GlcNAsylaation kasvavan merkittävästi, kun CDK9-aktiivisuutta estettiin. Tulokset korostavat O-GlcNAsylaation tärkeyttä sekä sen vielä vähän ymmärrettyä laajuutta geenin transkriptiossa.

Description

Supervisor

Frey, Alexander

Thesis advisor

Itkonen, Harri

Keywords

O-GlcNAcylation, transcription-associated cyclin-dependent kinases, hallmarks of cancer, prostate cancer

Other note

Citation

Permanent link to this item

https://urn.fi/URN:NBN:fi:aalto-202108298598

Collections

[dipl] Kemian tekniikan korkeakoulu / CHEM