Laktaasi-entsyymien puhdistaminen jäännössivuaktiivisuuksista

Thumbnail Image

URL

Journal Title

Journal ISSN

Volume Title

Helsinki University of Technology | Diplomityö
Checking the digitized thesis and permission for publishing
Instructions for the author

Authors

Date

2007

Department

Kemian tekniikan osasto

Major/Subject

Bioprosessitekniikka

Mcode

Kem-70

Degree programme

Language

fi

Pages

vii + 90 s. + liitt. 15

Series

Abstract

Työn kirjallisuusosassa on tarkasteltu laktoosin entsymaattista hydrolyysiä maitotuotteissa, laktaasin tuottoa eri organismeilla ja laktaasien sivuaktiivisuuksia sekä niiden mittaus- että puhdistusmenetelmiä. Lopuksi on mainittuna muutamien kaupallisten laktaasien toimittajia. Kokeellisen osan tarkoituksena oli puhdistaa kaupallinen homelaktaasi B (Aspergillus oryzae) ja hiivalaktaasi D (Kluyveromyces lactis) sivuaktiivisuuksistaan mahdollisimman puhtaaksi. Poistettavat sivuaktiivisuudet olivat proteaasit ja lipaasit. Tutkitut puhdistusmenetelmät olivat kiteytys, saostus, ionivaihto ja hydrofobisiin vuorovaikutuksiin perustuva kromatografia. Puhdistettujen laktaasien vaikutusta laktoosittomien maitotuotteiden virhemaun syntyyn tutkittiin aistinvaraisesti ja mittaamalla proteaasiaktiivisuutta. Parhaimmat puhdistustulokset saavutettiin hydrofobisiin vuorovaikutuksiin perustuvalla kromatografialla, kun käytetty hartsi oli adsorbenttihartsi XAD7HP. Tuolloin B-laktaasin laktaasiaktiivisuussaanto oli 95 %, proteaasiaktiivisuussaanto ja lipaasimäärä alkuperäisestä olivat 10 % ja 21 %. Vastaavat luvut D-laktaasin puhdistuksessa olivat 80 %, 50 % ja 0 %. Proteiinimäärän ja hartsin suhde oli 512 mg proteiinia g-1 hartsia, virtausnopeus oli 4 BV h-1 ja lämpötila 22 °C, kun pH oli 4,5 B-laktaasin puhdistuksessa ja 7,5 D-laktaasin puhdistuksessa. B-laktaasia kierrätettiin pylväässä 3 h ja D-laktaasia 6 h. Tutkimustulokset laktoosittomien maitotuotteiden virhemakujen synnystä puhdistetuilla laktaaseilla osoittivat, että puhdistettu B-laktaasi on puhdistamatonta B-laktaasia parempaa. Puhdistetulla B-laktaasilla hydrolysoitu maustamaton jogurtti oli lähes yhtä hyvää, jos ei parempaakin, kuin alkuperäinen maustamaton jogurtti, mihin ei ollut lisätty laktaasia. Vastaavia eroja ei huomattu aistinvaraisesti puhdistamattomalla ja puhdistetulla D-laktaasilla rasvattomassa UHT maidossa. Aistinvaraisissa makutesteissä havaittiin myös, että proteaasiaktiivisuuden ja makuhaittojen välillä ei välttämättä ole selkeää syy-seuraus suhdetta.

Description

Supervisor

Leisola, Matti

Thesis advisor

Kallioinen, Harri
Tossavainen, Olli
Harju, Matti

Keywords

Other note

Citation

Permanent link to this item

https://urn.fi/URN:NBN:fi:aalto-2020120553230

Collections

[dipl] Teknillinen korkeakoulu / TKK